色谱层析柱应该如何确定上样量
更新时间:2020-07-29 点击次数:1271次
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产品专为生物色谱开发,两端可调活塞支持了经典正相和反相色谱转向生物色谱的应用。通过快速紧锁式系统能迅速的对柱进行打开和装填密封,也能方便的拆卸进行零部件清洗。通过使用SP系列色谱柱,可以在药物研发的早期阶段更快、更简便地评估各种填料性并获取必要的放大数据。
在做层析实验的时候可能时常会遇到一个问题:一次实验可以上多少样品呢?多也不是少也不是,上样多了会造成一部分样品损失或者达不到预期的分离效果,上样少了无法充分使用色谱层析柱还要增加重复实验或者使用更大层析柱,真是件纠结的事情。我们今天要来给大家介绍的就是不同的色谱层析柱应该如何确定上样量。
色谱层析柱样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。
此外,直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。
分族分离时用短柱,一般凝胶柱长20-30厘米,柱高与直径的比较5:1─10:1,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1,常用凝胶柱有50×25厘米,10×25厘米。